5% Blocking Buffer

产品简介

5%的BSA( Bovine Serum Albumin)为常见的Western Blotting和免疫组化封闭液，兼容辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)和生物素标记的二抗。

本产品中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂，不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本产品不含生物素，不会干扰基于生物素的检测。

本产品为即用型产品，无需添加任何额外的试剂，可以直接用于印迹膜和免疫组化的封闭。

产品组成

实验操作指南

1.    Western Blotting的封闭

1)   转膜完成后，用Western洗涤液洗涤印迹膜1~2 min。

2)   根据膜的大小，在平皿或者其它适当容器中倒入一定体积的5%的BSA封闭液，确保封闭液能充分覆盖膜即可。常规western，一张约6.6×8.5 cm的膜推荐使用约10 ml左右的封闭液。

3)   用平头镊夹住膜的一角，将膜放置在封闭液中，使封闭液完全浸没膜，置于水平摇床上封闭约1 h。

4)   封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续实验。

2.    免疫组化的封闭

1)    脱蜡、水化组织切片。

2)    根据抗原抗体情况，必要时对切片进行抗原热修复或消化处理。

3)    切片上滴加3% H₂O₂(推荐使用Elabscience的E-IR-R115)室温10 min以灭活内源性酶。

4)    PBS清洗，3 min/次，3 次。

5)    滴加5% BSA封闭液，室温封闭30 min。甩去多余液体。

6)    按照免疫组化实验步骤进行一抗孵育等后续实验。

保存条件

2~8°C保存，有效期12个月。

注意事项

1.没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的，因此对于一些特殊的实验，可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。

2.Western Blotting实验取放膜应使用平头镊子，并仅轻轻夹取其边角，操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。

3. Western Blotting的膜和免疫组化的切片，请务必保持湿润，否则可能会产生难以封闭的异常背景。

4.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

5.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。